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如何正確對液相色譜儀進(jìn)行檢定?
2022-04-18 [1209]
  液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
 
  液相色譜儀的檢定方法:
 
  1.秒表:分度值小于0.1s。
 
  2.分析天平:zui大稱量200g,zui小分度值0.1mg。
 
  3.容量瓶
 
  4.微量注射器
 
  5.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑
 
  6.檢定方法:
 
  a.泵流量設(shè)定值誤差Ss、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定。將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器聯(lián)接好,以甲醇為液動相,按表1設(shè)定流量,待流速穩(wěn)定后,在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相,同時用秒表計(jì)時,準(zhǔn)確地收集10~25分鐘,稱重,按下式計(jì)算Ss和SR。Ss=(Fm—Fs)/Fs×100%SR=(Fmax—Fmin)/F×100%式中Ss為流量設(shè)定值誤差(%);Fm=(W2—W1)ρt·t為流量實(shí)測值;W2:容量瓶+流動相的重量(g);W1:容量瓶的重量(g);Fs:流量設(shè)定值(ml/min);ρt:實(shí)驗(yàn)溫度下流動相的密度(g/cm3);t:收集流動相的時間(min);SR:流量穩(wěn)定性誤差(%);Fmax:同一組測量中流量zui大值(ml/min);Fmin:同一組測量中流量zui小值(ml/min); F:同一組測量中的算術(shù)平均值(ml/min)。
 
  b.定性、定量測量重復(fù)性的檢定 將儀器聯(lián)接好,使之處于正常工作狀態(tài),用進(jìn)樣閥的定量管注入適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液(萘或聯(lián)苯)或穩(wěn)定的待分析樣品溶液,記錄保留時間和峰面積,連續(xù)測量5次,按下式計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。
 
  c.紫外檢測器性能
 
  可調(diào)波長紫外-可見光檢測器波長示值誤差和重復(fù)性誤差的檢定將檢測器與記錄儀聯(lián)好,接通電源穩(wěn)定后,先將檢測波長調(diào)至235nm,用甲醇用流動相,流速1.0ml/min,用進(jìn)樣器注入重鉻酸鉀的硫酸溶液(取120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg,精密稱定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml,搖勻,即得)20ul,待出峰時立即停泵,改用波長掃描方式,得到重鉻酸鉀在紫外-可見光區(qū)的吸收曲線,記錄其在235nm、257nm、313nm、350nm附近波長處的zui大或zui小吸收波長,分別找出各點(diǎn)zui大或zui小波長與標(biāo)準(zhǔn)波長之差即為波長示值誤差;重復(fù)測定3次,各點(diǎn)zui小與zui大值之差即為波長重復(fù)性誤差。
 
  基線漂移和基線噪聲的檢定將儀器各部分聯(lián)接好,紫外檢測器波長調(diào)到254nm,流動相為100%甲醇,流速為1.0ml/min,吸收度范圍選擇較靈敏檔,開機(jī),待基線穩(wěn)定后,記錄基線30-40分鐘,計(jì)算基線漂移和噪聲。
 
  較小檢測濃度在靜態(tài)條件下,用進(jìn)樣器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液,樣品峰高應(yīng)大于或等于兩倍基線噪聲峰高,按下式計(jì)算zui小檢測濃度。 Cl=2×HN×C /H式中,Cl:zui小檢測濃度(g/ml);HN:噪聲峰高(記錄儀器數(shù)或?qū)崪y高度cm);C:樣品濃度(g/ml);H:樣品峰高(記錄儀器數(shù)或?qū)崪y高度cm)。
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